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細胞簡介：

Cajal間質細胞以網絡狀分布在消化道腸神經系統末梢與平滑肌細胞之間的一類特殊細胞。胃腸道運動功能的產生和維持是Cajal間質細胞、腸神經系統以及平滑肌細胞三者協同作用的結果。間質細胞不僅能自發產生節律性慢波，而且能介導腸神經系統與平滑肌間的信號調節。

細胞特性：

1）  組織來源于實驗動物的正常腸組織。

2)  細胞鑒定：c-kit熒光染色為陽性。

3)  經鑒定細胞純度高于90%。

4)  不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)  細胞生長方式：梭形細胞，不規則細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 Delf 原代間質 細胞 培養體系 作為體外培養的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

人精加壓素（AVP）elisa檢測試劑盒

獼猴骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa檢測試劑盒

電鏡樣品固著液（2％Formalin 固著液）

小鼠結締組織生長因子（CTGF）elisa檢測試劑盒

大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒

組織中總磷酸鹽測試盒

大鼠(trypsin)elisa檢測試劑盒

尿素待測樣品處理試劑盒

小鼠S100鈣結合蛋白A7(S100A7)elisa檢測試劑盒

F-box蛋白相關蛋白33抗體 FBXO33

FITC標記人CD81單克隆抗體 human CD81/FITC

磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 Synaptojanin 2

卵泡抑素相關蛋白1抗體 FSTL1

蛋白磷酸酶1調節亞基1c抗體 PPP1R1C

電壓門控鉀通道Kv8.2抗體 KCNV2

鋅指蛋白ZZZ3抗體 ZZZ3

溴化丙胺太林相關蛋白2抗體 STOML2

R3H卷曲螺旋結構域蛋白1抗體 R3HCC1

RAS相關抑細胞生長蛋白1抗體 DIRAS1

絲/蘇蛋白磷酸酶PGAM5抗體 PGAM5

四磷酸鳥苷水解酶抗體 HDDC3

肌側索硬化癥相關蛋白4抗體 ALS2CR4

脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 2

17號染色體開放閱讀框59抗體 C17orf59

5-溴脫氧核苷（增殖標志物）單克隆抗體 BrdU(Proliferation Marker)

組蛋白H3-K122（mono）甲基化檢測試劑盒

大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)elisa分析檢測試劑盒

pre-α1-AT ELISA Kit

人過氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測試劑盒

大鼠腸間質細胞CATELISAkit

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。