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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

頸靜脈球瘤是指起源于頸靜脈球體外膜以及沿迷走神經(jīng)耳支和舌咽神經(jīng)鼓室支等部位分布的副神經(jīng)節(jié)腫瘤。按腫瘤生長(zhǎng)的部位，通常將發(fā)生于顱底頸靜脈孔及其附近者稱為頸靜脈球體瘤，發(fā)生于中耳鼓室者稱為鼓室球瘤，但臨床因經(jīng)常難以確定腫瘤的原發(fā)部位，故常將二者統(tǒng)稱為頸靜脈球瘤。

細(xì)胞特性：

1）組織來(lái)源于人的正常主動(dòng)脈組織。

2)細(xì)胞鑒定：S100熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 腫瘤 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)檢測(cè)試劑盒

HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanchondroitinsulfate,CS檢測(cè)試劑盒人軟骨素(CS)檢測(cè)試劑盒

總?cè)樗岽郎y(cè)樣品處理試劑盒20次

HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISAKit人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)檢測(cè)試劑盒

REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原

NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原

ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

植物D(VD)ELISA 試劑盒

Human ai Golgi aibody (AGAA) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體(AGAA)檢測(cè)試劑盒

PorcineLeptin,LEPELISAKit 豬瘦素(LEP)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFP(HumanAlpha-fetoprotein)ELISAKit人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousethrombieceptor,ELISAKit小鼠受體()檢測(cè)試劑盒

人頸靜脈球瘤細(xì)胞直鏈淀粉   250mg

Amylose,fromPotato   1g

抗蛋白酶   250mg

Aipain,Dihydrochloride   1g

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。